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兔腫瘤浸潤組織白細胞分離液試劑盒

更新時間：2016-07-07　點擊量：1978

兔腫瘤浸潤組織白細胞分離液試劑盒

兔腫瘤浸潤組織白細胞分離液試劑盒說明書
（細胞培養(yǎng)及分子生物學）
【產品規(guī)格】
200ml/Kit
【產品組成】
為方便廣大用戶使用，試劑內容如下：

	名稱	產品編號	規(guī)格
A	兔腫瘤浸潤組織白細胞分離液		200ml
B	樣本稀釋液（贈品）	2010C1119	200ml
C	清洗液（贈品）	2010X1118	200ml
D	F液（贈品）	F2013TBD	200ml
E	紅細胞裂解液（贈品）	NH4CL2009	100ml
F	說明書

【實驗前準備】
A．適用儀器
zui大離心力可達 1200g的水平轉子離心機
B．耗材

產品名稱	產品貨號	產地
15ml離心管散裝	339650	美國 NUNC
15ml離心管架裝	339651	美國 NUNC
50ml離心管散裝	339652	美國 NUNC
50ml離心管架裝	339653	美國 NUNC
無菌膠頭滴管或塑料滴管

【檢驗方法】
全過程樣本、試劑及實驗環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進行。
1.首先制備組織單細胞懸液，制備方法詳見“組織單細胞懸液制備技術”。
2.取一支15ml離心管，加入與制備的組織單細胞懸液等量的分離液（注：分離液zui少不
得少于 5ml）。
3.用吸管小心吸取制備的組織單細胞懸液加于分離液液面上，400-500g，離心20-30min。

（注：根據組織單細胞懸液樣本量確定離心條件，組織單細胞懸液量越大，離心力越大，
離心時間越長，具體離心條件需客戶自行摸索，以達到分離效果）。
4.離心后用吸管小心吸取所有環(huán)狀乳白色細胞層（一層或兩層），加入10 ml清洗液（產
品編號：2010X1118），混勻細胞。250g，離心 10min。重復洗滌 2-3次，即得所需白細
胞。
5.如有紅細胞殘留請使用紅細胞裂解液（產品編號：NH4CL2009）裂解紅細胞，具體操
作方法詳見“紅細胞裂解液使用說明”。
【注意事項】
1.全過程樣本、試劑及實驗環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進行。為獲得的實驗結果，zui
好在取樣 2h 內進行實驗，樣品存放時間越長，細胞分離效果越差。樣品放置超過 6h 后
分離效果更差甚至不能達到分離目的。
2.本實驗不要使用高聚合材質（如聚苯乙烯）的塑料制品，應使用無靜電、低靜電離
心管及未經堿處理過后的玻璃制品，因為靜電作用將導致細胞貼壁、堿處理的玻璃表面
會變成毛面，影響細胞分離效果。
3.分離液用量大于制備的組織單細胞懸液樣本時，分離效果更佳。
4.如實驗后細胞得率或活性過低，請上海研謹以尋求幫助、。
【儲存條件及有效期】
18-25℃保存，有效期 2年。本品易感染細菌，需無菌條件操作。無菌條件下操作，啟
封后置常溫保存。如 4℃保存，本分離液易出現(xiàn)白色結晶，影響分離效果。
【參考值（參考范圍）】
本實驗白細胞提取率及純度大于 80%。
下表為成年人外周血中各種細胞的數(shù)量及比例，用戶可適當進行參考。

【相關實驗技術方案】
1.組織單細胞懸液制備技術
2.所獲得白細胞的培養(yǎng)技術。

3.所獲得白細胞的核酸提取技術。
4.所獲得白細胞的鑒定方法
A.流式細胞技術
B.免疫組化技術
C.原位雜交技術
D.PCR技術
注：上述技術方案詳情請登陸本搜索“細胞分離、
純化、擴增、鑒定及生物治療技術手冊”，并在說明書項目欄下下載使用。
【可能存在的問題及解決方法】
1.由于血液粘度、細胞密度等差異可能造成的問題及解決方案如下表所示：

出現(xiàn)情況	出現(xiàn)原因	建議解決方案
離心后目的細胞存在于血漿層或稀釋液層	轉速過小或離心時間過短	適當增減轉速
離心后目的細胞存在于分離液中	轉速過大或離心時間過長	適當增減轉速
離心后白環(huán)層彌散	細胞密度過大	調整細胞密度
離心后白環(huán)層太淺或看不見	細胞密度過小	調整細胞密度

2.本分離液分離細胞的原理為密度梯度離心，其密度與溫度、大氣壓等密切相關。不同地
區(qū)客戶可根據當?shù)厍闆r對離心條件進行適當調整。建議對離心條件進行調整時，恒定離
心時間，對離心轉速進行調整。
3.本分離液依照標準，全部使用藥用級原料，性能指標與國產同類產品略有不同，可
能出現(xiàn)紅細胞沉降不*的情況，可以適當加大離心轉速。
注：在對離心條件進行調整時，離心轉速的加減以 50-100g為基數(shù)，直至達到分離效果，
離心力zui小不得小于 400g，zui大不得大于 1200g。離心時間以 20-30min為準。
其他部分產品：

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WBC1079P	TBD	狗臟器組織白細胞分離液試劑盒	100ml
WBC1079Z	TBD	狗腫瘤浸潤組織白細胞分離液試劑盒	100ml
WBC1086	TBD	牛外周血白細胞分離液試劑盒	100ml
WBC1086P	TBD	牛臟器組織白細胞分離液試劑盒	100ml
WBC1086Z	TBD	牛腫瘤浸潤組織白細胞分離液試劑盒	100ml
WBC1085	TBD	豚鼠外周血白細胞分離液試劑盒	100ml
WBC1085P	TBD	豚鼠臟器組織白細胞分離液試劑盒	100ml
WBC1085Z	TBD	豚鼠腫瘤浸潤組織白細胞分離液試劑盒	100ml
WBC1090C	TBD	雞外周血白細胞分離液試劑盒	100ml
WBC1090CP	TBD	雞臟器組織白細胞分離液試劑盒	100ml
WBC1078H	TBD	猴外周血白細胞分離液試劑盒	100ml
WBC1078HP	TBD	猴臟器組織白細胞分離液試劑盒	100ml
WBC1078HZ	TBD	猴腫瘤浸潤組織白細胞分離液試劑盒	100ml
WBC1110	TBD	豬外周血白細胞分離液試劑盒	100ml
WBC1110P	TBD	豬臟器組織白細胞分離液試劑盒	100ml
WBC1110C	TBD	豬腸黏膜組織白細胞分離液試劑盒	100ml
WBC1110Z	TBD	豬腫瘤浸潤組織白細胞分離液試劑盒	100ml
WBC1094	TBD	馬外周血白細胞分離液試劑盒	100ml
WBC1094P	TBD	馬臟器組織白細胞分離液試劑盒	100ml
WBC1094Z	TBD	馬腫瘤浸潤組織白細胞分離液試劑盒	100ml
WBC1087	TBD	羊外周血白細胞分離液試劑盒	100ml
WBC1087P	TBD	羊臟器組織白細胞分離液試劑盒	100ml
WBC1087Z	TBD	羊腫瘤浸潤組織白細胞分離液試劑盒	100ml
WBC1080F	TBD	魚全血白細胞分離液試劑盒	100ml
WBC1080FZ	TBD	魚組織白細胞分離液試劑盒	100ml

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